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細胞簡介：

兔肌腱干分離自肌腱組織；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構(gòu)成，色紅質(zhì)軟，有收縮能力，肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成，色乳白較硬，沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細胞（TSCs）是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細胞，其具有多向分化潛能，并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時該細胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細胞的普遍特性。肌腱干細胞可以被誘導向脂肪細胞、軟骨樣細胞、骨細胞分化；在裸鼠模型中，肌腱干細胞還可以形成肌腱樣組織，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力，軟骨相關基因和肌腱相關基因表達更高，具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力，因此可以作為組織工程中的種子細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肌腱干采用膠原酶、混合消化法并通過肌腱干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔肌腱干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)檢測試劑盒 ，英文名： BLC1 ELISA Kit

Human ula sensitive prostate specific aigen (PSA-U S) ELISA Kit 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)檢測試劑盒

SheepIerleukin6,IL-6ELISAKit 綿羊白介素6(IL-6)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforC4BP(HumanC4bindingprotein)ELISAKit人C4結(jié)合蛋白

細菌凍存培養(yǎng)基100毫升

rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

EPHA1重組小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 蛋白 Protein

氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)重組蛋白 Recombinant Hexosaminidase B Beta (HEXb)

NAA10重組人 NAA10 / ARD1A 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

ACVR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (Fc 標簽)

谷脫羧酶2(GAD2)重組蛋白 Recombinant Glutamate Decarboxylase 2, Acid (GAD2)

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

PGF重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 Protein

其他哺乳動物

CCL27重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 Protein

豚鼠促卵泡素(FSH)檢測試劑盒 ，英文名： FSH ELISA Kit

Human peptide YY (Peptide-YY) ELISA Kit 人多肽YY(Peptide-YY)檢測試劑盒

rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-HCG人絨毛膜(夾心法一/二步法)

細菌纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

rabbitHistamine,HISELISAKit兔子組胺(HIS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔肌腱干細胞人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。