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產(chǎn)品名稱:重組人趨化因子配體4(無動物源)(CCL4)
產(chǎn)品特點:重組人趨化因子配體4(無動物源)(CCL4)的相關產(chǎn)品:HER2 receptor(erbB-2 isoform 2 0.5mgHER2 receptor(erbB-2 isoform 2) c-erbB-2受體抗原FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白IL1B重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form) Protein
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-11-20
訪問次數(shù):24
重組人趨化因子配體4(無動物源)(CCL4)的詳細資料:
本產(chǎn)品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
商品屬性:
產(chǎn)品英文名稱:Human CCL4 Protein (Animal-Free)
產(chǎn)品中文名稱:重組人趨化因子配體4(無動物源)(CCL4)
規(guī)格:5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號:EY-01X8789
用途:僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
表達宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來源于:人趨化因子配體4(Ala24-Asn92)。
活性:通過其對轉(zhuǎn)染人 CCR5的 BaF3細胞的化學吸引能力來衡量。 ED??的這種效應小于10 ng/mL。
純度:>98%,使用SDS-PAGE檢測
通過LAL法測定,每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。
產(chǎn)品形式:凍干粉,凍干緩沖液為無菌的50 mM Tris and 150 mM NaCl, pH 8.5。
使用中注意事項:開蓋使用前,請先離心。本產(chǎn)品為凍干粉,推薦用該產(chǎn)品配套的Reconstit動?動
背景
C-C 基序趨化因子配體4(CCL4)是一種7.66 kDa 的細胞因子,含有69個氨基酸殘基。CCL4又稱巨噬細胞炎性蛋白 -1β (MIP-1β) ,主要由中性粒細胞、單核細胞、 B 細胞、 T 細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞和上皮細胞分泌。
操作步驟:
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導表達
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原
IDH1 Protein Human 重組人 IDH1 蛋白
S100A6重組小鼠 S100A6 蛋白 Protein
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白
HIST2H2BE重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein
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重組人趨化因子配體4(無動物源)(CCL4)S100A6重組小鼠 S100A6 蛋白 Protein
CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原
HIST2H2BE重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein
IDH1 Protein Human 重組人 IDH1 蛋白
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白
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