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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：SuperKine•  Enhanced Antifade Mounting Medium with DAPI

產(chǎn)品中文名稱：SuperKine•  增強型抗熒光淬滅劑含DAPI

規(guī)格：10 mL/50 mL

貨號：EY-01X8577
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

•  抗熒光淬滅效果強：封片后避光保存2周以上，仍可維持原有發(fā)光強度；

•  兼容性好：精心優(yōu)化的配方可兼容多種熒光染料 ；

•  操作便捷：即用型，無需配置。

保存建議:-20℃，避光保存12個月。

運輸條件:藍(lán)冰運輸

背景

因光照、pH值及溫度等環(huán)境影響或者熒光分子和其它分子相互作用等因素，造成熒光分子的不可逆破壞。使用熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡觀察時，可見信號減弱。SuperKine• 增強型抗熒光淬滅劑（含DAPI）用于對熒光組織和細(xì)胞樣品的封片。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha 0.5mgAlpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜多肽抗原

BID Protein Human 重組人 BID 蛋白

VCAM1重組小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

JAM2 Protein Rat 重組大鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白

NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein

豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒

Human maix metalloproteinase 11 (MMP11) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)檢測試劑盒

RabbitOncostatin-M,OSMELISAKit 兔抑瘤素M(OSM)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAi-GAD谷脫羧酶抗體(間接法二步法)

血液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測試劑盒20次

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit豬熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒

豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血清(NO)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血清淀粉樣蛋白A（SAA）檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)檢測試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

大鼠阿立新A(Orexin A)檢測試劑盒 ，英文名： Orexin A ELISA Kit

Rabbit macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 兔子巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)檢測試劑盒

ELISA 小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1sRII(Humansolubleierleukin-1receptorII)ELISAkit人白介素1可溶性受體Ⅱ

通用型空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni)試劑盒20次

ELISAKitTXB2大鼠血栓素B2

SuperKine•  增強型抗熒光淬滅劑含DAPIVCAM1重組小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha 0.5mgAlpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜多肽抗原

NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein

BID Protein Human 重組人 BID 蛋白

JAM2 Protein Rat 重組大鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。