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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；2ug/ml Puromycin

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FB飥#?

細(xì)胞分類：
*種：
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，進(jìn)口來(lái)源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
以下是Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存的相關(guān)產(chǎn)品，了解更多腫瘤細(xì)胞點(diǎn)擊進(jìn)入。
250克A1 MediumA1培養(yǎng)基

250克Yeast Extract Agar酵母提取物瓊脂

250克Lactose Peptone Broth乳糖蛋白胨肉湯

250克Cary-Blair Transfort MediumCary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基

250克MFC MediumMFC培養(yǎng)基

250克Brilliant Green Lactose Medium亮綠乳糖培養(yǎng)基

250克Lecithin Tween 80 Nutrient Agar吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂

250克Acetamide Agar乙酰胺瓊脂

TCHP  抑癌蛋白TCHP抗體   規(guī)格 0.2ml*

TCF9/GCF  轉(zhuǎn)錄因子9抗體   規(guī)格 0.2ml*

TCF7L2  轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體   規(guī)格 0.1ml*

TCF3/E2A/E47  轉(zhuǎn)錄因子3抗體（螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47）   規(guī)格 0.2ml*

TCF12/HEB  轉(zhuǎn)錄因子12抗體   規(guī)格 0.2ml*

TCERG1/CA150  轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體   規(guī)格 0.1ml*

TCEB3/Elongin A  轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體   規(guī)格 0.1m*

TBX-5  轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體   規(guī)格 0.1ml*

TBX3  轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體   規(guī)格 0.2ml*

Tbx21/T-bet  T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體   規(guī)格 0.1ml*

TBX2/T-box2  血栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)   規(guī)格 0.2ml*

TBX2/T-box2  新型抑癌基因抗體   規(guī)格 0.2ml*
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Bio  標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/APC  APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgG   規(guī)格 0.1ml*

Mouse anti-rabbit IgG ascites  小鼠抗兔IgG腹水   規(guī)格 1ml*

Mouse Anti-rabbit IgG  小鼠抗兔IgG   規(guī)格 1mg*

Mouse Anti-human IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-human IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM   規(guī)格 0.1ml*
【培養(yǎng)指南】
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-550保存凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。