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NFκB DRGelisa試劑盒品牌服務承諾：
一、質(zhì)量保證,有問題免費包換；
二、提供免費代測服務（為客戶提供來樣檢測服務,zui大限度實驗結(jié)果的有效性）；
三、提供全程技術指導。

人核轉(zhuǎn)錄因子κB（NFκB）DRGelisa試劑盒 Human NFκB ELISA Kit
NFκB DRGelisa試劑盒品牌【實驗用途】NF-kB，是一種蛋白質(zhì)分子，其結(jié)構為一種體內(nèi)的生物誘導分子(biological trigger)，是在體內(nèi)許多疾病的生理作用上扮演了重要的角色，從癌癥到骨質(zhì)疏松癥，再到細菌感染，皆與之脫離不了關系，NF-kB發(fā)現(xiàn)與哺乳動物的細胞，平時結(jié)合與另一分子--IkB，IkB使得NF-kB分子失去生物活性，當一組啟動信號啟動NF-kB后，IkB脫離NF-kB，NF-kB恢復活性，進入細胞核。NF-kB位于TLR下游信號通路的樞紐位置，當細胞受到生物應激刺激后激活NF-kB，活化的NF-kB進入細胞核調(diào)節(jié)炎性細胞因子的表達，啟動針對病原微生物的固有免疫和獲得性免疫。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)（biotin）標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
試劑盒組成及試劑配制 ：
1.NFκB DRGelisa試劑盒品牌 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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操作流程：
（1）NFκB DRGelisa試劑盒品牌待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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