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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實驗中應(yīng)該注意的問題，包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問題，希望對你有用處。elisa試劑盒有著準確性高、靈敏度高、特異性強的諸多優(yōu)點，深受廣大用戶朋友的喜愛。然而，在實驗過程中，也需要注意很多問題。對此，需要遵守一些規(guī)則，才能更好地進行實驗，取得較好的實驗成果。Elisa方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。在Elisa測定中影響因素較多，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。下面，我們一起看下需要注意的問題：
1．樣品稀釋
一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗確定，以保證試驗的靈敏度和特異性。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng)，如果血清不稀釋，不可避免會產(chǎn)生很強的非特異性反應(yīng)，出現(xiàn)假陽性。
2．試劑盒平衡 
Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗前平衡至室溫(約25℃)，一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠，樣品孵育時間相對縮短，ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。 
3．樣品和試劑的混勻
在稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗的均一性。 
4．加樣
加樣是一項很重要的步驟。加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。
5．溫育
溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。
6．洗板
固相免疫測定技術(shù)是一種非均相免疫測定技術(shù)，需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分離開來，以保證ELISA測定的特異性。洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置1分鐘，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及時更換吸水紙，尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗結(jié)果。
7．抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒顯色
顯色一定要控制時間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時間過短，結(jié)果偏低；顯色時間過長，空白增高或者非特異性顯色增加。
Forskolin    40mg    66575-29-9     佛司可林標準品
Midodrine Related Compound A    40mg    3600-87-1     米多君相關(guān)物質(zhì)A標準品
    40mg    256-81-5    賽庚啶相關(guān)物質(zhì)A標準品
    40mg    54779-58-7     反苯環(huán)丙胺相關(guān)物質(zhì)A標準品
    40mg    5586-89-0     苯環(huán)丙胺相關(guān)物質(zhì)B標準品
    40mg        相關(guān)物質(zhì)B標準品
    40mg        碘帕醇相關(guān)物質(zhì)C標準品
8-Bromotheophylline    400mg    10381-75-6    8-溴標準品
Acetaminophen    400mg    103-90-2    標準品
Carbidopa    400mg    38821-49-7    標準品
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

 

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