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ELISA進口單克隆抗體的應(yīng)用
一、檢驗醫(yī)學診斷試劑
作為檢驗醫(yī)學實驗室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術(shù),并且單克隆抗體的應(yīng)用很大程度上促進了商品化試劑盒的發(fā)展。目前,應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于:①病原微生物抗原、抗體的檢測;②腫瘤抗原的檢測;③免疫細胞及其亞群的檢測;④激素測定;⑤細胞因子的測定。
單克隆抗體對抗原的識別,與多克隆抗體有很大的不同。不同試劑盒因使用的單克隆抗體不同,識別抗原的位點不同,導(dǎo)致檢測結(jié)果有一定差異。因此,標準化問題還需要進一步研究。
二、蛋白質(zhì)的提純
單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質(zhì)(如Separose2B、4B、6B等)上,并制備成層析柱。當樣品流經(jīng)層析柱時,待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合,其余成分不能與之結(jié)合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強度或pH,欲分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。
三、小分子抗體的應(yīng)用
將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與藥物或放療物質(zhì)連接,利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官,直接殺傷靶細胞,稱為腫瘤導(dǎo)向治療。另外,將放射性標記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)可進行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。小分子抗體是分子量較小但具有抗原結(jié)合功能的分子片段。它有以下*的優(yōu)勢:分子量小,穿透性強,抗原性低;由于不含F(xiàn)c段,不會與帶有Fc段受體的細胞結(jié)合,不良反應(yīng)少;半衰期短,有利于及時中和及清除毒素;另外,可在原核系統(tǒng)表達及易于基因工程操作。
四、抗體融合蛋白的應(yīng)用
1,腫瘤的體內(nèi)顯像診斷單鏈抗體排除速度快,穿透力強,因此在腫瘤組織中的分布指數(shù)較完整抗體分子高。在放射顯像時,放射性核素排除較快,對身體危害程度小,顯像的本底較低,因此是較為理想的顯像定位診斷載體,為腫瘤的診斷提供了新的途徑。
2.病毒的診斷和抗病毒感染單鏈抗體為醫(yī)學上某些至今難以治療的疾病如病毒病的診斷和治療提供了新的、的免疫制劑。因此用于免疫治療和診斷顯得尤為重要
血液性疾病的診斷抗人白血病單鏈抗體可用于白血病的免疫診斷及分型。