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腸道微生物ELISA試劑盒調(diào)控外周淋巴結(jié)發(fā)育
血液中的淋巴細(xì)胞通過高內(nèi)皮靜脈（high endothelialvenules，HEVs）進(jìn)入淋巴結(jié)中。這一過程首先是由一些地址素（addressin）的引導(dǎo)，其中包括a4b7的受體MadCAM-1以及CD62L的受體PNAd。在剛出生的小鼠中，MAdCAM-1的表達(dá)量較高，隨著時間的推移，大約兩周以后，PNAd的表達(dá)量占據(jù)主導(dǎo)地位。這一上調(diào)引導(dǎo)了基于L-選擇素（L-selectin）的成體淋巴細(xì)胞歸巢的效應(yīng)。有報道指出，一類表達(dá)趨化因子受體CCR7的樹突狀細(xì)胞（DC）能夠進(jìn)入次級淋巴器官，進(jìn)而促進(jìn)高內(nèi)皮靜脈（HEV）的發(fā)育，但這類DC的活動是否受到腸道微生物的調(diào)節(jié)仍未可知ELISA試劑盒。
在SPF小鼠中，腸道相關(guān)淋巴結(jié)的發(fā)育受到一系列轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控，包括ID2, IRF8, Batf3, IRF4。同時也受到 Notch2-依賴型RALDH &CD11b CD103 DC的調(diào)控。這類DC十分特殊，有報道指出這類DC能夠?qū)⒊Ｒ?guī)CD4 T細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導(dǎo)型Treg細(xì)胞，以及誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的歸巢行為。因此，這類細(xì)胞很可能受到腸道微生物的調(diào)節(jié)，進(jìn)而影響淋巴結(jié)的發(fā)育。
對此，來自清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)研究所的石彥教授課題組利用無菌培養(yǎng)小鼠模型與基因表達(dá)譜分析手段，證明了腸道微生物對RALDH DC以及淋巴結(jié)發(fā)育的影響。相關(guān)結(jié)果發(fā)表在zui近一期的《Immunity》雜志上。
首先，為了證明無菌小鼠中外周淋巴結(jié)的發(fā)育缺陷現(xiàn)象是由淋巴細(xì)胞歸巢能力下降導(dǎo)致的，作者們利用CFSE標(biāo)記了一定量的淋巴結(jié)細(xì)胞并通過尾靜脈注射的方式分別導(dǎo)入SPF小鼠與GF（即無菌）小鼠體內(nèi)。實驗結(jié)束24小時之后，在SPF小鼠以及GF的腹股溝淋巴結(jié)，腸系膜淋巴結(jié)以及脾臟中都檢測到了CFSE陽性的細(xì)胞群體。但是，相比于脾臟，GF小鼠的腹股溝淋巴結(jié)以及腸系膜淋巴結(jié)中的CFSE陽性細(xì)胞數(shù)量明顯低于SPF小鼠。進(jìn)一步的細(xì)胞特征分析也表明，CD4 T細(xì)胞，CD8 T細(xì)胞，以及CD19 B細(xì)胞數(shù)量都明顯減少。同時，作者發(fā)現(xiàn)五周左右的GF小鼠腹股溝淋巴結(jié)HEV中MAdCAM-1的表達(dá)量仍未下調(diào)，而PNAd的表達(dá)量也未明顯上調(diào)，GF小鼠的淋巴結(jié)大小也明顯低于SPF小鼠。通過將SPF小鼠與GF小鼠進(jìn)行一段時間的共室培養(yǎng)后，作者發(fā)現(xiàn)GF小鼠HEV中兩類地址素的表達(dá)量特征開始與SPF小鼠靠攏。這說明腸道微生物可能影響了HEV的生理特征。之后，作者將GF小鼠與SPF小鼠不同淋巴結(jié)的RNA提取出來并進(jìn)行了深度測序。有意思的是，MAdCAM-1與PNAd-1的RNA表達(dá)水平并沒有明顯差異。這說明這一蛋白水平的差異可能是由于轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的變化導(dǎo)致的。有意思的是，SPF小鼠中與脂肪代謝以及信號通路的相關(guān)基因表達(dá)量明顯高于GF小鼠ELISA試劑盒。