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ELISA試劑盒是利用抗原抗體之間專一性結(jié)合的特性,對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)方法,通過底物顯色深淺代表待測(cè)物在樣本中含量的多少。
定性ELISA只能粗略表示樣本待測(cè)物含量在某個(gè)特定值以上或以下,定性ELISA通常設(shè)置陽性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N),結(jié)果分別用“陰性”和“陽性”表示。ELISA定性測(cè)定的“陰性”和“陽性”的判斷標(biāo)準(zhǔn)是試劑盒所確定的陽性判斷值,即cut-off值。
定量ELISA是通過一系列不同已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品所對(duì)應(yīng)的OD值做出標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后將樣本的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣本中待測(cè)物的含量。
在檢測(cè)ELISA試劑盒zui后一步溫育中定性與定量也是有區(qū)別的。在定量測(cè)定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色的情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷。
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