抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應注意:
由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用,這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有堅固的理論外也要實踐,看一下zui終可不可以應用到自己試驗當中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
封閉
繼包被之后用高濃度的無關蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。
常用封閉劑有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價廉,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清和酪蛋白等等。但zui終選用什么,要依據(jù)試驗具體來實踐。
洗滌板
可以說在抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為達到分離游離的和結合的酶標記物的目的,清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時會有一定誤差,人為因素很大(當然有條件的用洗板機除外),洗的不*或串了孔,對如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。
STET 緩沖液 500ML 0 STET BUFFER
SOUTHERN 試劑盒(含膜) 10 x 10 square cm 0 TOTAL BLOT SOUTHERN KIT W/ MEMBRANE
SOUTHERN 試劑盒(不含膜) 1 Kit 0 TOTAL BLOT SOUTHERN KIT W/OUT MEMB.
SOC 培養(yǎng)基 100ML 0 SOC MEDIA
SOC 培養(yǎng)基 6x5ml 0 SOC MEDIA
RNA貯存液 12x1ML 0 RIBORESERVE RNA STORAGE SOLUTION
RNA貯存液 50ML 0 RIBORESERVE RNA STORAGE SOLUTION
RNA膠上樣試劑盒 100 reactions 0 RNA GEL LOADING KIT
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒
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