- 大鼠胰島干細(xì)胞;ALLRPISC2012優(yōu)惠活動(dòng)
- 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10?
- 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;RS1優(yōu)惠活動(dòng)
- 如何正確存儲(chǔ)E2檢測ELISA試劑盒?
- 人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒?”十月節(jié)日過后的專屬優(yōu)惠活動(dòng)
- 黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2?
- 庚肝抗體IgM檢測試劑盒的工作原理與應(yīng)用解析
- 大鼠多巴胺(DA)elisa試劑盒?開學(xué)季特惠”與中秋團(tuán)圓禮包活動(dòng)火熱進(jìn)行
- 大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;RM1九月開學(xué)季優(yōu)惠活動(dòng)
- 小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa試劑盒?“八月中旬優(yōu)惠盛宴”
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中肺炎病毒(PVM)表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠肺炎病毒(PVM)表達(dá)。用純化的大鼠肺炎病
毒(PVM)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中肺炎病毒(PVM)相結(jié)合,經(jīng)洗
滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的肺炎病毒(PVM)抗體結(jié)合,形成抗體
抗原 酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化
成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),
與 CUTOFF 值相比較,從而判定標(biāo)本中大鼠肺炎病毒(PVM)的存在與否。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液
2 酶標(biāo)試劑
3 酶標(biāo)包被板
4 樣品稀釋液
5 顯色劑 A 液
6 顯色劑 B 液
標(biāo)本要求
20ml×1 瓶
6ml×1 瓶
12 孔×8 條
6ml×1 瓶
6ml×1 瓶
6ml×1/瓶
7 終止液
8 陽性對(duì)照
9 陰性對(duì)照
10 說明書
11 封板膜
12 密封袋
6ml×1 瓶
0.5ml×1 瓶
0.5ml×1 瓶
1 份
2 張
1 個(gè)
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1
孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50!l。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液 40!l,然后再加待測樣品 10!l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不
觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50!l,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50!l,再加入顯色劑 B50!l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50!l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程
計(jì)算和結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為肺炎病毒(PVM)陰性
陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為肺炎病毒(PVM)陽性
。
注意事項(xiàng)
1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
上一篇 細(xì)胞培養(yǎng)支原體感染 下一篇 肝癌的癥狀