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RF elisa試劑盒操作步驟：

1）運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯。

2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定，能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。

3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。

4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。

5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。

6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。

7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。

8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當即測定成果。

9）在450nm波利益測定各孔的OD值。

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